Presentación de trabajos libres (Libro de resúmenes on-line)

Introducción:Las Escherichia coli diarreogénicas(DEC) son una causa importante de diarrea, sin embargo su frecuencia está subestimada debido a la dificultad para diferenciar las cepas patogénicas de la microbiota intestinal. Las DEC se clasifican en distintos grupos, basados en factores de virulencia específicos. Para su identificación, los métodos tradicionales serológicos y fenotípicos no son suficientes, por lo que se requiere el uso de biología molecular como la PCR multiplex(PCRm)

Objetivo:Evaluar el desempeño de la PCRm para detectar la frecuencia y distribución etaria de Escherichia coli enteroinvasiva(EIEC), enteroagregativa(EAEC) y enterohemorrágica productora de shigatoxinas(EHEC) en muestras fecales(MF) de pacientes con diarrea aguda en un hospital de CABA, entre julio 2021-diciembre 2023

Materiales y Métodos:Se incluyeron 568 MF de pacientes con gastroenteritis aguda que fueron cultivadas en medios selectivos. Se identificaron las colonias de E. coli por VITEK-MS. Se extrajo el DNA por shock térmico y se realizó PCRm utilizando los primers: paH8/15 para EIEC, aggRKs1/2 para EAEC y Stx1/Stx2 para EHEC. Los amplificados se analizaron por electroforesis en gel de agarosa

Resultados:La mediana de edad fue de 35 meses. De las 568 MF, 267(47%) resultaron positivas por cultivo y 49(8,5%) por PCRm. De estas, 19 fueron EAEC, 16 EHEC productoras de shigatoxina 2 y 15 EIEC. En 37(12,2%) muestras que fueron negativas por cultivo, se obtuvo un resultado positivo por PCR. El 42,9%(21/49) de los pacientes con PCR positiva correspondieron al rango etario de 2 a 5 años donde se observó mayor prevalencia de EAEC y EIEC. Las principales asociaciones detectadas por PCRm y cultivo resultaron:1 campylobacter jejuni(CJ)-EHEC, 1 CJ-EIEC, 2 CJ- EAEC y 1 Yersinia enterocolitica-EAEC

Conclusiones:En este estudio, EAEC fue la DEC más prevalente. El mayor número de casos en los que se identificaron DEC correspondió a menores de 5 años, destacando el rango etario de 2 a 5 con mayor prevalencia para EAEC y EIEC. El uso de PCRm permitió detectar el patógeno causante de la diarrea en un 12,2% de los casos en los que el cultivo tradicional resultó negativo. La principal asociación de patógenos detectada por cultivo y PCRm fue con CJ. Por estos motivos, si bien Escherichia coli suele ser considerada parte de la flora intestinal, resulta indispensable incorporar en la rutina técnicas de biología molecular para la detección de DEC, tanto con fines diagnósticos como epidemiológicos

Introducción: La tuberculosis (TB) está en aumento en los últimos 10 años en Argentina. Es un grave problema de salud pública y la farmacorresistencia es un obstáculo hacia su control. A nivel individual un tratamiento de TB multirresistente implica su prolongación y mayor posibilidad de efectos adversos. Pero la falta de un diagnóstico oportuno y un tratamiento adecuado lleva al fracaso o recaída y sus consecuencias. Resumen: Paciente de 13 años que consulta por recaída de TB. Presenta hemoptisis, tos productiva, fiebre y baciloscopia de esputo positiva para Bacilos Acido Alcohol Resistentes (BAAR ++). Antecedentes: tratamiento de TB finalizado 3 meses previos con esquema estándar de 6 meses totales, autoadministrado en otra institución. La adherencia había sido muy deficiente. Durante el primer tratamiento se constató por cultivo sensibilidad a la Isoniacida (H) y la Rifampicina (R), mejoría clínico-radiológica y baciloscopia de esputo negativa al sexto mes. En el episodio actual se realizó: 1) tomografía donde se evidenció consolidación en base izquierda con imagen cavitaria asociado a áreas de árbol en brote y vidrio esmerilado, 2 )Esputo BAAR (++), 3) microbiología: prueba rápida de amplificación de ácidos nucleicos por la plataforma BD MAX™ que informó Complejo Mycobacterium tuberculosis (CMT) detectable, con resistencia a Isoniacida (H) no detectada y resistencia a Rifampicina (R) detectada. Por tratarse de una nueva plataforma en validación en este laboratorio se realizó Xpert MTB/RIF Ultra: CMT detectado, Resistencia a R NO detectada. El cultivo en medio líquido BD BACTEC™ MGIT™ informó Mycobacterium tuberculosis sensible a R. Debido a la discrepancia entre el método genotípico y fenotípico y entre los métodos genotípicos se realizó secuenciación del genoma completo que informó la mutación Phe433Phe en la región determinante de resistencia a la rifampicina del gen rpoB. Esta mutación está catalogada como mutación silente por lo cual la paciente fue tratada con esquema de primera línea (Isoniacida, Rifampicina, Pirazinamida y Etambutol) con buena evolución y supervisión del tratamiento. Conclusión: La TB farmacorresistente requiere para su manejo un diagnóstico precoz. La mayor parte de la resistencia a fármacos en TB se atribuye a mutaciones cromosómicas. Las pruebas disponibles se han ido perfeccionando, pero, en un pequeño porcentaje, se requiere de métodos más precisos como secuenciación genética.

Introducción: en 2024 se registró la mayor tasa de notificación de tuberculosis (TBC) de los últimos 15 años. El 5.3% de los casos presentó alguna resistencia a drogas. Esto deriva en tratamientos más prolongados, con mayores efectos adversos y costos. La incorporación de métodos moleculares al algoritmo diagnóstico permite la detección precoz de resistencias y facilita la selección temprana del tratamiento adecuado, lo cual mejora la respuesta clínica y es crucial para reducir la transmisión de la enfermedad. En ocasiones, existen discrepancias entre las pruebas genotípicas y los métodos fenotípicos, lo que plantea un desafío en el manejo de los pacientes. Se presenta el caso de un adolescente con TBC con discordancia entre las pruebas genotípicas y fenotípicas de detección de resistencia a Rifampicina. Presentamos un caso de tuberculosis resistente en un adolescente, con discordancia en las pruebas de resistencia.

Caso clínico: Paciente de 17 años de edad, HIV negativo, que consultó el 23/06/2024 por tos productiva, sudoración nocturna y pérdida de peso de un mes de evolución. Presentaba contacto intradomiciliario con TBC. La radiografía de tórax mostró lesiones cavitadas en el vértice derecho. Se realizó esputo que reportó BAAR +++ y prueba de detección molecular (MAS-PCR) que identificó Mycobacterium tuberculosis con resistencia a Rifampicina detectada. Inició tratamiento el 12/07/2024 con esquema alargado para TBC resistente. Posteriormente, se recibió resultado de cultivo positivo, cepa sensible a isoniazida y rifampicina por método fenotípico (BD BACTEC^TM MGIT^TM). Ante la discordancia, se derivó la muestra al centro de referencia para secuenciación de genoma completo que arrojó mutación rpoB526. Se trata de una mutación limítrofe, asociada a falla del tratamiento estándar. El paciente continúa con el tratamiento individualizado, con cultivo negativo al mes del inicio y buena evolución clínica y radiológica.

Conclusión: Los métodos moleculares tienen especial importancia en el diagnóstico temprano de la tuberculosis resistente. Cuando se presenta discordancia entre las pruebas genotípicas y fenotípicas, es fundamental incorporar métodos más avanzados como la secuenciación genómica para seleccionar un tratamiento adecuado.

Las infecciones respiratorias bajas, son comunes en pacientes hospitalizados, pero los métodos “estándar” suelen tener dificultades para identificar los agentes causantes. El panel Pneumonia "BIOFIRE® FILMARRAY®" (PPF) permite la detección rápida de 18 bacterias, 7 marcadores de resistencia y 9 virus mediante PCR multiplex, lo que mejora la rapidez del diagnóstico. Aunque ofrece ventajas frente al cultivo, también tiene limitaciones, como la posible identificación de agentes no viables, y la exclusión del panel de algunos patógenos, lo que hace necesario complementarlo con el cultivo convencional para obtener un diagnóstico definitivo. Este estudio evaluó el desempeño del panel molecular de neumonía (PPF) y la concordancia (índice k de Cohen) entre éstos resultados y el crecimiento en cultivo de muestras respiratorias recibidas en el Laboratorio de Bacteriología.

Se realizaron análisis retrospectivos de muestras respiratorias de pacientes de un Hospital Pediátrico, entre el 1 de enero de 2023 y diciembre de 2024. Todas las muestras fueron procesadas mediante el método FilmArray, y fueron sometidas a cultivo convencional. Los datos fueron codificados y se calculó el coeficiente k de Cohen para evaluar el acuerdo entre ambos métodos diagnósticos.

Se procesaron 51 muestras por PPF. De las cuales, 40 fueron positivas para algún germen. Se realizaron cultivos a 49 muestras, y en 20 de ellas se observó desarrollo microbiano. El índice k de Cohen fue de 0.07, lo que indica una ligera concordancia entre ambos métodos. Los agentes bacterianos más frecuentemente detectados por PPF fueron S. aureus, H. influenzae, A. baumannii, P. aeruginosa y S. pneumoniae. Los agentes virales más comunes fueron rinovirus/enterovirus. En el cultivo convencional, S. aureus desarrolló solo en el 20% de las muestras positivas por PPF, y H. influenzae y S. pneumoniae no evidenciaron crecimiento. A través del cultivo también se identificaron otros gérmenes no detectados por PPF, como S. maltophilia y levaduras. En 9 casos se evidenció la presencia de mecanismos de resistencia (KPC, NDM, VIM y mecA), los cuales no se detectaron mediante métodos fenotípicos.

El PPF es una herramienta que acelera el diagnóstico etiológico, con una mayor sensibilidad que el cultivo bacteriano. No debe reemplazar los métodos tradicionales, como el cultivo, sino complementarlos. Esta combinación mejora el diagnóstico y apoya los programas de optimización de antimicrobianos en los centros de salud.

AUTORES: Martinez, V.; Villalba, N.; Suasnabar, S. Armando, G; Ezcurra, G.

INTRODUCCIÓN: La meningoencefalitis aguda es una inflamación que involucra las meninges y el parénquima cerebral. La etiología puede ser infecciosa o autoinmunitaria. Predomina en menores de 5 años, siendo de origen viral (Enterovirus) el responsable de la mayoría de los casos. La epidemiología ha estado influenciada por las vacunas contra Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae y Neisseria meningitidis. El uso de pruebas moleculares por FA en líquido cefalorraquídeo (LCR), ha mejorado el diagnóstico y tratamiento, optimizando el manejo de estos pacientes. OBJETIVO: Describir la epidemiología de las meningoencefalitis confirmadas por FA. MATERIALES Y MÉTODOS: Se realizó un estudio transversal retrospectivo durante el período 01 de noviembre de 2021 al 31 de noviembre de 2024. Se incluyó pacientes de 0 a 15 años con signos y síntomas sugestivos de meningoencefalitis; se solicitó FA panel Meningitis/Encefalitis en 380 muestras, de las cuales 54 casos fueron positivos para uno o más patógenos. Se analizaron además las variables demográficas, clínicas, microbiológicas y de tratamiento. RESULTADOS: El 61% de los casos corresponden al sexo masculino y el 59% en menores de un año. El Enterovirus fue el patógeno más frecuente (29,6%), seguido por el Virus Herpes 6 (13%) y Neisseria meningitidis (9%). En 4 de ellos el cultivo de LCR fue positivo (streptococcus agalactiae, streptococcus pneumoniae y Pseudomona Aeruginosa), los dos primeros coinciden con el rescate en FA. En cuanto a los hallazgos citoquímicos, el 57% fueron patológicos, principalmente en casos bacterianos, en especial por Neisseria meningitidis. El tratamiento empírico con Ceftriaxona se realizó en la mayoría de los casos. El 74% de los pacientes requirieron cuidados intensivos, con una mediana de internación de 12,5 días. La tasa de letalidad fue del 3,8%, con Enterovirus y Haemophilus influenzae como causantes. Los contactos estrechos recibieron quimioprofilaxis según indicación. Un paciente de 12 años no presentaba esquema de vacunación completo para la edad, con rescate en FA de LCR a Streptococcus pneumoniae. CONCLUSIONES: El uso del panel FA permitió un diagnóstico rápido y preciso de meningoencefalitis infecciosa en niños; identificación temprana de los patógenos para el tratamiento específico y la implementación de medidas de control, como la quimioprofilaxis en contactos estrechos.

Introducción: El botulismo del lactante es poco frecuente pero potencialmente grave. Se presenta con síntomas leves, pudiendo progresar con parálisis fláccida e insuficiencia respiratoria.

Se presenta el caso de una paciente de 1 mes con botulismo del lactante, con el objetivo de resaltar la importancia de una intervención temprana

Resumen clínico:

Paciente de 1 mes y 15 días oriunda de Posadas, Misiones, sin antecedentes patológicos. Consultó en hospital zonal por cuadro de 72 horas de evolución caracterizado por constipación, succión y llanto débil, debilidad generalizada y dificultad respiratoria. Afebril. Refiere lactancia exclusiva, niega haber administrado miel o hierbas.

La valoran en mal estado general, con hipotonía generalizada y dificultad respiratoria. Evoluciona con insuficiencia respiratoria y necesidad de asistencia respiratoria mecánica (ARM), por lo que se deriva para estudio y tratamiento.

A su ingreso requiere ARM, con hipotonía generalizada, reflejos osteotendinosos ausentes, reflejo fotomotor lento y ptosis palpebral. Se plantean diagnósticos diferenciales infectológicos: sepsis neonatal tardía, meningoencefalitis, mielitis aguda, botulismo, zika, dengue.

Empíricamente inicia ceftriaxona, ampicilina y aciclovir. Se realizan reactantes de fase aguda (normales); urocultivo y hemocultivos negativos. Líquido cefalorraquídeo con cultivo negativo, PCR HSV y EV negativas, citoquímico normal. Tóxicos en orina negativos. Serologías negativas (HIV, HBV, HCV, CHAGAS, Toxoplasmosis, VDRL, EBV, CMV). Resonancia de sistema nervioso central normal. Con diagnóstico sindromático de parálisis aguda fláccida: búsqueda de enterovirus en secreciones nasofaríngeas y materia fecal, negativo. Se deriva materia fecal a laboratorio nacional de referencia para búsqueda de poliovirus y toxina botulínica.

Ante la sospecha de botulismo se indica antitoxina botulínica equina 500 UI/ Kg con buena tolerancia. Con cultivos negativos suspendió tratamiento antibiótico y antiviral.

A los 3 días se recibe informe de toxina botulínica tipo A positiva en materia fecal.

Requirió ARM por 21 días, con buena evolución, tolerando aire ambiental y con adecuada movilidad.

Conclusión:

La confirmación de este caso de botulismo del lactante se realizó mediante el aislamiento de la toxina en materia fecal. Se administró antitoxina botulínica con buena evolución.

Se resalta la gravedad clínica, la importancia del diagnóstico precoz y el tratamiento oportuno del botulismo del lactante.

Introducción La gastroenteritis aguda (GEA) es una causa importante de morbilidad mundial. Puede ser viral, bacteriano o parasitario, lo que hace esencial un diagnóstico preciso para aplicar el tratamiento adecuado. A pesar del avance en técnicas moleculares, los laboratorios clínicos aún dependen de métodos convencionales, como inmunocromatografía y cultivo, por su accesibilidad y bajo costo. Objetivos Determinar la frecuencia y distribución estacional de los patógenos causantes de GEA mediante técnicas convencionales.Evaluar la asociación entre leucocitos en las muestras fecales y el microorganismo identificado. Analizar los perfiles de susceptibilidad antibióticaMetodología Estudio descriptivo retrospectivo basado en registros de laboratorio de muestras fecales analizadas por GEA entre enero2021 y junio2024. Se recopilaron resultados de inmunocromatografía y coprocultivos y datos demográficos (edad, sexo y origen de la muestra: consulta en emergencia o internación). El análisis incluyó el cálculo de frecuencias y porcentajes para los patógenos identificados, así como pruebas de chi-cuadrado para evaluar la asociación entre los datos demográficos y los resultados diagnósticos. Inmunocromatografía:Rotavirus, Norovirus y Adenovirus. Aislamiento de bacterias enteropatógenas (Salmonella, Shigella, Yersinia). Resultados Se identificó un microorganismo en 290 muestras fecales. La edad promedio fue de 25.9 meses rango: 0.5 - 156 meses, 164 masculinos y 126 femeninos. 162 muestras provinieron de emergencia, 104 de cuidados moderados, 14 de cuidados intensivos (CTI) y 10 de hemato-oncología. Las infecciones virales representaron el 83% (241) de las muestras, mientras que las bacterianas correspondieron al 17% (51). El patógeno más frecuente fue Rotavirus (177 muestras). Entre las bacterias, Shigella spp. fue la más común (31 aislamientos) seguida por Salmonella (17 casos). El 42% de las cepas de Shigella spp mostraron resistencia a la ampicilina y 2 de ellas a las cefalosporinas de 3erG, por betalactamasas de espectro extendido.La incidencia de Shigella aumentó en primavera-verano, 21 casos, mientras que Rotavirus fue más prevalente en otoño-invierno,155 casos.
Se detectaron leucocitos en 84% (43) de las infecciones bacterianas y en 12% (28) de las virales. Conclusiones Las técnicas convencionales siguen siendo útiles en el diagnóstico de GEA en contextos de recursos limitados, aunque incorporar métodos más sensibles mejoraría la precisión diagnóstica